詳細情報 |
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標準的: | はい | 猫。いいえ。: | NC1011、NC1012、NC1013 |
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指定: | 5ml、60ml、450ml | 適用: | サイズ選択および一掃 |
ターゲット: | DNA | ロゴの印刷: | ロゴの印刷を使って |
輸送のパッケージ: | パッキング | 保存性: | 2年 |
貯蔵条件: | 2-8°Cの店 | ||
ハイライト: | セリウムNGSの図書館の構造,NGSの図書館の構造の一掃Magbeads |
製品の説明
GDSPure DNAの選択Magbeads
猫。いいえ:NC1011、NC1012、NC1013
部品
部品 | NC1011 | NC1012 | NC1013 |
GDSPure DNAの選択Magbeads | 5つのmL | 60のmL | 450のmL |
貯蔵
この試薬は2-8°C.で保たれるべきである。凍らせてはいけない。保存性は開いていなかったら2年である。
記述
正確に150 bpから1000のbpにDNAの片を浄化し、選ぶGDSPure DNAの選択のMagbeadsの使用高性能super-paramagneticビードおよび優秀な緩衝比率また更により大きい。DNAの図書館の構造の操作でもたらされた余分なヌクレオチド、塩、酵素および他の不純物は簡単な洗浄プロセスの後で、配列、交配、PCRおよび酵素の消化力のような下流の適用で直接使用することができる浄化された片を得るために取除かれる。GDSPure DNAの選択Magbeadsは手動および自動フォーマットによって使用することができる。
適用
次世代の配列のためのサイズ選択および、qPCR配列する、一掃(NGS)、Sanger ddPCRおよびマイクロアレイ、等。
実験の前の予備作業
1. 洗浄の解決:新しい80% (V/V)のエタノールの解決
2. 溶離液の解決:ヌクレアーゼなしの水かTEの緩衝
3. 渦
4. 磁気棚
5. 選択の範囲の正確さを保障するため、DNAのサンプル容積は≥ 50のμLべきである
6. 実験の前に、冷却装置からの磁気ビードを取り、20分以上の室温に使用の前に暖めなさい
議定書
指定サイズ(Single-Sided選択)より大きいDNAの片のサイズ選択
1. 適切な遠心分離機管に50のμL DNAのサンプルを準備しなさい。
2. サンプルへの表1の第1ビードの付加の比率に従ってある特定の容積の再停止されたGDSPure DNAの選択Magbeadsを加えなさい。10回(または30 sの渦)のためのピペットが付いている穏やかに打撃。室温で5分のためのサンプルを孵化させなさい。
例えば、大きいすべての片を選ぶためにサンプルのより250 bpの、40のμL (0.80X)の磁気ビードの懸濁液を加える。
3. 上澄みからビードを分けるために適切な磁気棚に管を置きなさい。解決が明確である時、ピペットによって注意深く上澄みを放棄するため取除き、(ビードを放棄してはいけない)。
4. 管に80%の新たに準備されたエタノールの200 μlを間、磁気棚で加える。30 sのための室温で、それから注意深く上澄みを放棄するために取除き、孵化させれば(ビードを妨げてはいけない)。
5. 合計2洗浄のためのステップ4を一度繰り返しなさい。
注:第2ワシントン州の後ですべての目に見える液体を取除くことを忘れないでいなさい。
6. 空気は管が開いたふたが付いている磁気棚にある間、磁気ビードの表面に明らかな光沢がないまでビードを乾燥する。
注:not overdryビードを、これDNAのより低い回復で起因するかもしれないしなさい。ビードが割れ始めるとき余りに乾燥している。
7. 磁気棚から管を取除きなさい。30-40 μlのヌクレアーゼなしの水かTEの緩衝にビードからのDNAターゲットを溶離しなさい。少なくとも10回の上下にピペットで移すことによってよく混合すれば30のための渦のミキサーでs.は室温で3-5分の間孵化する。
8. 磁気棚に管を置きなさい。5分後で(または解決が明確なとき)、新しい管に上澄みを移しなさい。選択は完了し、指定DNAはそれに続く実験に使用するか、または-20°Cで長い間貯えることができる。
特定のサイズ間隔(両面の選択)のDNAの片のサイズ選択
1. 50のμL DNAのサンプルを適切な遠心分離機管に準備し、A.として分類しなさい。
2. 10回加えなさい(または30 sの渦)のためのピペットが付いている管のA. Gentlyのの打撃への表1の第1ビードの付加の比率に従ってある特定の容積の再停止されたGDSPure DNAの選択Magbeadsを。室温で5分のためのサンプルを孵化させなさい。
例えば、サンプルの片約250 bpを選ぶために、40のμL (0.80X)の磁気ビードの懸濁液を加えなさい。
- 上澄みからビードを分けるために適切な磁気棚に管Aを置きなさい。解決が明確なとき、注意深く上澄みを新しい管に取除き、B. Discardのビードとして分類しなさい。
4. 10回加えなさい(または30 sの渦)のためのピペットが付いている管のB. Gentlyのの打撃への表1の第2ビードの付加の比率に従ってある特定の容積の磁気ビードの懸濁液を。室温で5分のためのサンプルを孵化させなさい。
例えば、サンプルの片約250 bpを選ぶために、10のμL (0.20X)の磁気ビードの懸濁液を加えなさい。
5. 磁気棚に管Bを置きなさい。解決が明確である時、注意深く上澄みを放棄するため取除き。
6. 管Bに80%の新たに準備されたエタノールの200 μlを間、磁気棚で加える。30 sのための室温で、それから注意深く上澄みを放棄するために取除き、孵化させれば(ビードを妨げてはいけない)。
7. 合計2洗浄のためのステップ6を一度繰り返しなさい。
注:第2ワシントン州の後ですべての目に見える液体を取除くことを忘れないでいなさい。
8. 空気は管が開いたふたが付いている磁気棚にある間、磁気ビードの表面に明らかな光沢がないまでビードを乾燥する。
注:not overdryビードを、これDNAのより低い回復で起因するかもしれないしなさい。ビードが割れ始めるとき余りに乾燥している。
9. 磁気棚から管Bを取除きなさい。30-40 μlのヌクレアーゼなしの水かTEの緩衝にビードからのDNAターゲットを溶離しなさい。少なくとも10回の上下にピペットで移すことによってよく混合すれば30のための渦のミキサーでs.は室温で3-5分の間孵化する。
10. 磁気棚に管Bを置きなさい。5分後で(または解決が明確なとき)、新しい管に上澄みを移しなさい。選択は完了し、指定DNAはそれに続く実験に使用するか、または-20°Cで長い間貯えることができる。
表1:サイズ選択のための推薦された条件
おおよそのサイズ | 200 bp | 250 bp | 300 bp | 400 bp | 500 bp | 600 bp | 700 bp | |
ビードの比率 | 第1ビードの付加 | 0.90X | 0.80X | 0.70X | 0.60X | 0.55X | 0.50X | 0.45X |
第2ビードの付加 | 0.50X | 0.20X | 0.20X | 0.20X | 0.15X | 0.15X | 0.15X |
ノート
1. 指示を使用の前に注意深く読み、指示に従って作動させなさい。
2. 遠心分離機管のエタノールは溶出の前に溶出の効率を保障するためにできる限り取除かれるべきである。
3. 溶離液の容積は実験条件、20以下μLに従って調節することができる。
4. 磁気ビードは遠心分離、凍結および他の操作を避けるべきである。使用の前に、ビードの懸濁液はおよび室温に暖まるために20分以上の間置かれて渦および他の方法によって十分に混合される。
5. 管カバーで渦の間に掛かり、DNAの損失を減らすために操作をピペットで移す液体を避けなさい。
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